측방유동스트립 검출법을 이용한 현장형 종균모니터링 분석 방법(QR 코드 연동 사용자 편의 매뉴얼)

원리

• 산업적으로 대량 생산된 김치의 품질을 향상시키기 위해 종균이 개발 및 적용되고 있습니다. 종균은 품질유지기한 연장, 균일화, 위생성 향상, 기능성 부여 등의 효과를 제공합니다. 종균의 김치 내 우점율 측정, 즉 종균의 관리 및 추적은 품질관리 및 유지 측면에서 중요한 문제입니다.
• 고리-매개 등온증폭법(Loop-mediated isothermal amplification assay, LAMP)은 단일 온도(65℃ 이하)에서 표적 유전물질의 증폭이 가능하므로 고가의 온도조절장치/유전자증폭기(thermocycler)가 필요하지 않습니다. 일반적인 PCR보다 신속하고 감도가 좋아 현장진단에 용이합니다. 본 검출방법에서는 고리-매개 등온증폭법을 응용하여 비색법에 의한 시각화 및 정량분석결과를 제공합니다.

대상 균주

• 고함량의 만니톨이 함유된 김치 제조용 종균 류코노스톡 메센테로이드 WiKim32, 류코노스톡 메센테로이드 WiKim0121 (2025년 6월 예정)

시험법

- 측방유동스트립 검출법

1. 검체(김치액) 채취
2. 표적 핵산(DNA) 추출: 100℃에서 1시간 동안 가열하는 것으로 대체 가능
3. 표적핵산 추출액(1~5μL)과 신호 프로브를 혼합하여 비색검출법 반응물 제조
4. 항온수조(60℃), 50분간 반응시킴
5. 반응물 20 μL를 테스트기*의 검체 점적 부위에 떨어뜨림(약 15분 후 결과 확인 가능)
비상업적 목적 이용 요청 시 소량의 테스트기와 반응물 제조 키트 제공(문의: 062-610-1832 원태웅)

종균김치 적용 예시

- 검사결과가 시험선(T)과 대조선(C)이 두 줄로 나타나면 종균이 검출되었음을 의미합니다.